Določanje beljakovin v urinu

Običajno urin zdrave osebe običajno vsebuje manj kot 0,002 g / l in redko do 0,012 g / l beljakovin.

Obstajajo kvalitativne in kvantitativne metode za določanje beljakovin v urinu, ki temeljijo na koagulaciji v urinu ali na meji medijev (urin in kislina); merjenje stopnje koagulacije količinsko opredeljuje vzorec.

• test sulfosalicilne kisline (poenoten);
• segrevanje z ocetno kislino;
• detekcija beljakovin z indikatorskim papirjem (črtami) itd.

• enotna metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov;
• s sulfosalicilno kislino;

Metode za določanje beljakovin v urinu:

Vsebnost beljakovin v delih urina, zbranih ob različnih dnevnih časih, se lahko zelo razlikuje.

Odvisno od dnevne izgube beljakovin se razlikujejo naslednje stopnje proteinurije: zmerna - do 1 g; medij - od 1 do 3 g; izrazit - več kot 3 g.

Obstajata dve glavni vrsti proteinurije:

• proteinurija zaradi bolezni sečil;
• proteinurija z lezijami (boleznimi) ledvic.

Proteinurija, povezana z vnetnimi procesi sečil, ki jo spremlja pojav v urinu večjega števila levkocitov ali eritrocitov, ki pa ne odpravlja istočasnega vnosa beljakovin v urin iz ledvičnega parenhima t vsebnost beljakovin redko presega 1 g / l.

V večini primerov je ledvična proteinurija povezana s povečano prepustnostjo glomerulov in je razdeljena v dve skupini:

• fiziološka proteinurija;
• patološka proteinurija.

Med fiziološko proteinurijo spadajo primeri začasnega pojava beljakovin v urinu, ki niso povezani z boleznimi:

• po zaužitju velike količine hrane, ki vsebuje veliko količino nedenaturiranih beljakovin (surovo meso, surova jajca);
• z intenzivnim mišičnim delom (dolgi pohodi, športni dogodki);
• pri hladni kopeli ali prhanju;
• z močnimi čustvenimi izkušnjami;
• z epileptičnimi napadi.

Razlikujte ortostatsko ali mladostno, proteinurijo, ki se pojavlja pri otrocih in mladostnikih in mimoidočih. V smislu diferencialne diagnostike je praktično pomembno, da se ortostatska albuminurija pogosto najde v obdobju okrevanja po akutnem glomerulonefritisu. Patološka ledvična proteinurija je lahko posledica organskih bolezni ledvic in drugih organov in sistemov: akutni glomerulonefritis; kronični glomerulonefritis; akutni pielonefritis; kronični pielonefritis; nefropatija nosečnic; različne bolezni, povezane s povišano telesno temperaturo; hudo kronično srčno popuščanje; amiloidoza ledvic; lipoidna nefroza; tuberkuloza ledvic; hemoragične vročice; hemoragični vaskulitis; huda anemija; hipertenzija itd.

Beljakovine v urinu: metode za določanje

Patološka proteinurija je eden najpomembnejših in trajnih znakov bolezni ledvic in sečil. Določanje koncentracije beljakovin v urinu je bistven in pomemben element urinskega testiranja. Identifikacija in kvantitativna ocena proteinurije je pomembna ne le pri diagnozi številnih primarnih in sekundarnih ledvičnih bolezni, temveč tudi pri oceni sprememb v intenzivnosti proteinurije v dinamiki. Zaznavanje beljakovin v urinu, tudi v sledovih, mora biti zaskrbljujoče za možno bolezen ledvic ali sečil in zahteva ponovno analizo. Zlasti je treba omeniti nesmiselnost testiranja urina in zlasti določanje beljakovin v urinu brez upoštevanja vseh pravil za njegovo zbiranje.

Vse metode za določanje beljakovin v urinu lahko razdelimo na:

• Kakovost,
• Semikvantitativno
• Kvantitativno.

Kvalitativne metode

Vsi visokokakovostni vzorci beljakovin v urinu temeljijo na sposobnosti denaturiranja proteinov pod vplivom različnih fizikalnih in kemičnih dejavnikov. V prisotnosti beljakovin v vzorcu urina obstaja bodisi motnost ali izguba flokulentnega sedimenta.

Pogoji za določanje beljakovin v urinu glede na reakcijo strjevanja krvi:

1. Urin mora biti kisel. Alkalni urin je nakisan z več (2–3) kapljicami ocetne kisline (5–10%).
2. Urin mora biti jasen. Zamazanost se izloči s pomočjo papirnega filtra. Če motnost ne izgine, dodajte smukec ali požgan magnezijev oksid (približno 1 čajna žlička na 100 ml urina), pretresite in filtrirajte.
3. Kvalitativni test je treba opraviti v dveh epruvetah, eden od njih - nadzor.
4. Iskanje umazanije mora biti na črni podlagi v presvetljeni svetlobi.

Kvalitativne metode za določanje beljakovin v urinu vključujejo:

Kot kažejo številne študije, nobeno od številnih znanih metod za kvalitativno določanje beljakovin v urinu ne omogoča pridobitve zanesljivih in ponovljivih rezultatov. Kljub temu se v večini CDL v Rusiji te metode široko uporabljajo kot presejalni testi - v urinu s pozitivnim kvalitativnim odzivom. Med kvalitativnimi reakcijami se pogosteje uporabljata Gellov test in vzorec s sulfosalicilno kislino, vendar se vzorec s sulfosalicilno kislino večinoma šteje za najbolj primeren za odkrivanje patološke proteinurije. Preskus vrenja se trenutno praktično ne uporablja zaradi njegove zahtevnosti in trajanja.

Semikvantitativne metode

Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov temelji na Geller-jevem testu, tako da pri tej metodi opazimo enake napake kot pri Geller-jevem testu.

Trenutno se diagnostični trakovi vedno bolj uporabljajo za določanje beljakovin v urinu. Za polkvantitativno določanje beljakovin v urinu na traku je najpogosteje uporabljeno barvilo bromofenol modro v citratnem pufru. Vsebnost beljakovin v urinu ocenjujemo po intenzivnosti modro-zelene barve, ki se razvije po stiku reakcijske cone z urinom. Rezultat se oceni vizualno ali z uporabo analizatorjev urina. Kljub veliki priljubljenosti in očitnim prednostim suhih kemijskih metod (enostavnost, hitrost analize), te metode analize urina na splošno in zlasti določanje beljakovin niso brez resnih pomanjkljivosti. Ena od njih, ki vodi do izkrivljanja diagnostičnih informacij, je večja občutljivost indikatorja bromofenol modra na albumin v primerjavi z drugimi beljakovinami. V zvezi s tem so testni trakovi v glavnem prilagojeni za odkrivanje selektivne glomerularne proteinurije, ko je skoraj vse beljakovine v urinu predstavljeno z albuminom. Z napredovanjem sprememb in prehodom selektivne glomerularne proteinurije v neselektivno (pojav globulinov v urinu) so rezultati določanja beljakovin podcenjeni glede na prave vrednosti. To dejstvo onemogoča uporabo te metode za določanje beljakovin v urinu za oceno stanja ledvic (glomerularnega filtra) skozi čas. V tubularni proteinuriji so tudi rezultati določanja beljakovin podcenjeni. Določanje beljakovin z uporabo diagnostičnih trakov ni zanesljiv pokazatelj nizke ravni proteinurije (večina trenutno razpoložljivih diagnostičnih trakov nima sposobnosti za ulov beljakovin v urinu pri koncentraciji nižji od 0,15 g / l). Negativni rezultati določanja beljakovin na črtah ne izključujejo prisotnosti globulinov, hemoglobina, uromucoida, Bens-Jonesovega proteina in drugih paraproteinov v urinu.

Kosmiči sluzi z visoko vsebnostjo glikoproteinov (na primer pri vnetnih procesih v sečilih, piuriji, bakteriuriji) se lahko usedejo na indikatorsko območje traku in povzročijo lažne pozitivne rezultate. Lažno pozitivni rezultati so lahko povezani tudi z visoko koncentracijo sečnine. Slaba osvetlitev in slabo zaznavanje barv lahko povzročita netočne rezultate.

V zvezi s tem je treba uporabo diagnostičnih trakov omejiti na postopke pregleda, rezultate, pridobljene z njihovo pomočjo, pa je treba obravnavati le kot indikativno.

Kvantitativne metode

Pravilna kvantitativna določitev beljakovin v urinu v nekaterih primerih ni lahka naloga. Težave pri njegovi rešitvi so določene z naslednjim številom dejavnikov:

• nizka vsebnost beljakovin v urinu zdrave osebe, pogosto na pragu občutljivosti najbolj znanih metod;
• prisotnost številnih spojin v urinu, ki lahko motijo ​​potek kemijskih reakcij;
• pomembna nihanja vsebnosti in sestave beljakovin v urinu pri različnih boleznih, zaradi katerih je težko izbrati ustrezen kalibracijski material.

V kliničnih laboratorijih se pretežno uporabljajo tako imenovane "rutinske" metode za določanje beljakovin v urinu, vendar ne dajejo vedno zadovoljivih rezultatov.

Z vidika strokovnega analitika, ki dela v laboratoriju, mora metoda, namenjena kvantitativnemu določanju beljakovin v urinu, izpolnjevati naslednje zahteve: t

• imajo linearno razmerje med absorpcijo kompleksa, ki nastane med kemično reakcijo, in vsebnostjo beljakovin v vzorcu v širokem razponu koncentracij, s čimer se izognemo dodatnim operacijam pri pripravi vzorca za študijo;
• morajo biti enostavni, ne zahtevajo visoko usposobljenega izvajalca, izvajati se morajo z majhnim številom operacij;
• imajo visoko občutljivost, analitično zanesljivost pri uporabi majhnih količin preučenega materiala;
• biti odporni na različne dejavnike (razlike v sestavi vzorca, prisotnost zdravil itd.);
• sprejemljive cene;
• biti lahko prilagodljivi na avtomatske analizatorje;
• rezultat določanja ne sme biti odvisen od sestave beljakovin v vzorcu urina.

Nobena od trenutno znanih metod za kvantitativno določanje beljakovin v urinu ne more v celoti trditi, da je "zlati standard".

Kvantitativne metode za določanje beljakovin v urinu lahko razdelimo na turbidimetrične in kolorimetrične.

Turbidimetrične metode

Turbidimetrične metode vključujejo:

• določanje beljakovin s sulfosalicilno kislino (SSC),
• določanje beljakovin s triklorocetno kislino (THC),
• določanje beljakovin z benzetonijevim kloridom.

Turbidimetrične metode temeljijo na zmanjšanju topnosti urinskih proteinov zaradi nastajanja suspenzije suspendiranih delcev pod vplivom precipitacijskih sredstev. Vsebnost beljakovin v preskusnem vzorcu se ocenjuje bodisi z intenzivnostjo sipanja svetlobe, ki jo določa število delcev, ki razpršujejo svetlobo (nefelometrična metoda analize), bodisi z zmanjšanjem svetlobnega toka z nastalo suspenzijo (turbidimetrična metoda analize).

Velikost sipanja svetlobe v padavinskih metodah zaznavanja beljakovin v urinu je odvisna od številnih dejavnikov: hitrosti mešanja reagentov, temperature reakcijske zmesi, pH medija, prisotnosti tujih spojin, metod fotometrije. Skrbno upoštevanje reakcijskih pogojev prispeva k tvorbi stabilne suspenzije s konstantno velikostjo delcev in pridobitvijo relativno ponovljivih rezultatov.

Nekatera zdravila vplivajo na rezultate turbidimetričnih metod za določanje beljakovin v urinu, kar vodi do tako imenovanih "lažno pozitivnih" ali "lažno negativnih" rezultatov. Med njimi so nekateri antibiotiki (benzilpenicilin, kloksacilin, itd.), Snovi, ki vsebujejo jod, ki vsebujejo jod, in sulfa.

Turbidimetrične metode so slabo standardizirane, kar pogosto vodi do napačnih rezultatov, toda kljub temu se zaradi nizkih stroškov in razpoložljivosti reagentov pogosto uporabljajo v laboratorijih. Najbolj razširjena metoda v Rusiji je določanje beljakovin s sulfosalicilno kislino.

Kolorimetrične metode

Najbolj občutljive in natančne so kolorimetrične metode za določanje celotnih beljakovin v urinu, ki temeljijo na specifičnih reakcijah beljakovinskih beljakovin.

Te vključujejo:

1. biuretna reakcija,
2. Lowry metoda
3. metode, ki temeljijo na sposobnosti različnih barvil za tvorbo kompleksov z beljakovinami:
   • Ponceau S (Ponceau S),
   • Coomassie Brilliant Blue Coomassie Briljantno modra
   • Pirogalol rdeča.

Z vidika izvajalca je v vsakodnevnem delu laboratorija z velikim pretokom raziskav biuretna metoda zaradi velikega števila operacij neprimerna. Hkrati je za to metodo značilna visoka analitična zanesljivost, omogoča določanje beljakovin v širokem razponu koncentracij in odkrivanje albuminov, globulinov in paraproteinov s primerljivo občutljivostjo, zaradi česar se biuretna metoda šteje za referenco in je priporočljiva za primerjavo drugih analitičnih metod za odkrivanje beljakovin v urinu. Biuretna metoda določanja beljakovin v urinu je prednostno izvedena v laboratorijih, ki služijo nefrološkim oddelkom in se uporabljajo v primerih, ko so rezultati določitve z drugimi metodami vprašljivi, kot tudi za določitev količine dnevne izgube beljakovin pri nefroloških bolnikih.

Lowryjeva metoda, ki ima večjo občutljivost kot biuretna metoda, združuje biuretno reakcijo in Folinovo reakcijo na aminokisline tirozin in triptofan v proteinski molekuli. Kljub visoki občutljivosti ta metoda ne zagotavlja vedno zanesljivih rezultatov pri določanju vsebnosti beljakovin v urinu. Razlog za to je nespecifična interakcija Folinovega reagenta z neproteinskimi komponentami urina (najpogosteje aminokisline, sečna kislina, ogljikovi hidrati). Ločitev teh in drugih komponent urina z dializo ali obarjanjem beljakovin omogoča uspešno uporabo te metode za kvantitativno določanje beljakovin v urinu. Nekatera zdravila - salicilati, klorpromazin, tetraciklini lahko vplivajo na to metodo in izkrivljajo rezultate študije.

Zadostna občutljivost, dobra ponovljivost in lahkost določanja beljakovin z veznimi barvili so obetavne, vendar visoki stroški reagentov preprečujejo njihovo širšo uporabo v laboratorijih. Trenutno je metoda pirogalol rdeča v Rusiji vse pogostejša.

Pri proučevanju ravni proteinurije je treba upoštevati, da imajo različne metode za določanje proteinurije različno občutljivost in specifičnost za številne urinske beljakovine.

Na podlagi empiričnih podatkov je priporočljivo določiti beljakovine z dvema različnima metodama in izračunati pravo vrednost z uporabo ene od naslednjih formul:

proteinurija = 0,4799 B + 0,5230 L;
proteinurija = 1,5484 B - 0,4825 S;
proteinurija = 0,2167 S + 0,7579 L;
proteinurija = 1,0748 P - 0,0986 B;
proteinurija = 1.0104 P - 0.0289 S;
proteinurija = 0,8959 P + 0,0845 L;

kjer:
B - merilni rezultat s Coomassie G-250;
L je rezultat merjenja z Lowryjevim reagentom;
P - rezultat merjenja s pirogalolnim molibdatom;
S je rezultat merjenja z sulfosalicilno kislino.

Glede na izrazita nihanja ravni proteinurije v različnih dnevnih časih in odvisnost koncentracije beljakovin v urinu od diureze, njene različne vsebnosti v posameznih porcijah urina, je za patologijo ledvic zdaj običajno, da oceni resnost proteinurije zaradi dnevne izgube beljakovin v urinu, tj. dnevna proteinurija. Izražena je vg / dan.

Če dnevnega urina ni mogoče zbrati, je priporočljivo določiti koncentracijo beljakovin in kreatinina v eni porciji urina. Ker je hitrost sproščanja kreatinina čez dan dokaj stalna in ni odvisna od sprememb v stopnji uriniranja, je razmerje med koncentracijo beljakovin in koncentracijo kreatinina konstantno. To razmerje se dobro ujema z dnevnim izločanjem beljakovin in se zato lahko uporablja za oceno resnosti proteinurije. Normalno razmerje beljakovin / kreatinina mora biti manjše od 0,2. Protein in kreatinin merimo vg / l. Pomembna prednost metode ocenjevanja resnosti proteinurije z razmerjem protein-kreatinin je popolna odstranitev napak, povezanih z nezmožnostjo ali nepopolnim zbiranjem dnevnega urina.

Literatura:

• O. V. Novoselova, M. B. Pyatigorskaya, Yu. E. Mihajlov, "Klinični vidiki odkrivanja in vrednotenja proteinurije", Priročnik vodje CPL, št. 1, januar 2007
• A. V. Kozlov, "Proteinurija: metode za njeno odkrivanje", predavanje, St. Petersburg, SPbMAPO, 2000
• VL Emanuel, “Laboratorijska diagnostika bolezni ledvic. Urinarni sindrom “, - Priročnik vodje KDL, št. 12, december 2006
• V.I. Pupkova, L.M. Prasolov - Določanje beljakovin v urinu in cerebrospinalni tekočini. Koltsovo, 2007
• Priročnik kliničnih laboratorijskih raziskovalnih metod. Ed. E. A. Kost. Moskva, "Medicina", 1975

Sorodni članki

Kvantitativne metode za določanje celotnih urinskih beljakovin

Vsak vzorec urina je primeren za kvantifikacijo beljakovin. Večina raziskovalcev raje določi količino beljakovin v urinu, ki se zbere na dan, da bi ugotovila dnevno izgubo beljakovin.

Oddelek: Analiza urina

Semikvantitativne metode za določanje celotnih beljakovin v urinu

Trenutno se diagnostični trakovi vedno bolj uporabljajo za določanje beljakovin v urinu. Za polkvantitativno določanje beljakovin v urinu na traku je najpogosteje uporabljeno barvilo bromofenol modro v citratnem pufru. Vsebnost beljakovin v urinu ocenjujemo po intenzivnosti modro-zelene barve, ki se razvije po stiku reakcijske cone z urinom.

Oddelek: Analiza urina

Kvalitativne metode za določanje skupnih beljakovin v urinu

Vsi visokokakovostni vzorci beljakovin v urinu temeljijo na sposobnosti denaturiranja proteinov pod vplivom različnih fizikalnih in kemičnih dejavnikov. V prisotnosti beljakovin v vzorcu urina obstaja bodisi motnost ali izguba flokulentnega sedimenta.

Oddelek: Analiza urina

Določanje beljakovin v vzorcu z 20% sulfosalicilne kisline

Vzorec z 20% sulfosalicilno kislino se nanaša na kvalitativne reakcije za določanje beljakovin v urinu. Ker temelji na koagulacijski reakciji, mora preskušani urin izpolnjevati določene zahteve: biti prosojen in imeti kislo reakcijo.

Oddelek: Analiza urina

Geller test

Geller test je kvalitativna reakcija za določanje beljakovin v urinu. Ker temelji na koagulacijski reakciji, mora preskušani urin izpolnjevati določene zahteve: biti prosojen in imeti kislo reakcijo.

Oddelek: Analiza urina

Kvalitativna določitev beljakovin v urinu

Oprema na delovnem mestu

Sestava delovnega mesta za določanje beljakovin v urinu vključuje naslednje elemente:

1. Kemične cevi, aglutinacija.
2. Set merilnih pipet.
3. Pipete z ozkim koncem.
4. Štedilnik ali plinski gorilnik.
5. Črni papir
6. Ledena ocetna kislina.
7. Sulfosalicilna kislina.
8. Koncentrirana dušikova kislina.
9. Destilirana voda.

Metode za določanje beljakovin v urinu

Vse metode, uporabljene za kvalitativno določanje beljakovin v urinu, ki temeljijo na koagulaciji beljakovin. Koagulacija beljakovin se kaže v izrazitem oblaku (od opalescence do visoke motnosti) ali obarjanju kosmičev.

Kvalitativno določanje beljakovin v urinu se lahko izvede na enega od naslednjih načinov:

1. vrelišče z 10% raztopino ocetne kisline;
2. reakcijo z 20% raztopino sulfosalicilne kisline;
3. reakcija s 50% raztopino dušikove kisline (Hellerjev vzorec);
4. reakcijo z 1% raztopino dušikove kisline v nasičeni raztopini natrijevega klorida (modificiran Gellerjev vzorec po Larionic).

Pred kvalitativnim določanjem beljakovin v urinu se izvedejo naslednja pripravljalna dela:
1. Turbidni urin se filtrira skozi filtrirni papir. Če ni mogoče dobiti čistega filtrata, se ga ponovno filtrira skozi isti filter ali pa se urin zmeša z majhno količino infuzorne zemlje ali talka, nato pa se filtrira.
2. Če je urin alkalen, ga nakisamo z 10% raztopino ocetne kisline do šibko kisle reakcije pod nadzorom lakmusovega ali univerzalnega indikatorskega papirja.
3. Z majhno vsebnostjo soli (svetlo rumena ali bledo rumena urina z nizko specifično težo) za vsako
V vzorec dodamo nekaj kapljic nasičene raztopine natrijevega klorida, ker pomanjkanje soli povzroči koagulacijo beljakovin.
4. Stopnja motnosti se opazi s črnim ozadjem. Za ozadje uporabite črni karton ali črni papir, uporabljen na fotografiji. Računovodska reakcija na črni podlagi vam omogoča, da ugotovite najmanjšo stopnjo motnosti.

V ločenem stojalu so oštevilčene cevi. Proizvajajo eno od spodaj opisanih reakcij.

1. Vrelišče vzorca z 10% raztopino ocetne kisline. Za proizvodnjo tega vzorca je potrebna 10% raztopina ocetne kisline, ki se pripravi takole: 10 ml ledocetne kisline se postavi v jeklenko in dopolni z destilirano vodo do oznake 100 ml.

Tehnika določanja beljakovin. V kemično cevko se postavi 10-12 ml filtrirane urinirane šibko kisle reakcije. Nato zgornji del epruvete z urinom nežno segrejemo do vrenja in dodamo 8-10 kapljic 10% raztopine ocetne kisline. Preskušana epruveta z urinom se pregleda na črni podlagi v presvetljeni svetlobi. V prisotnosti beljakovin v urinu se pojavlja motnost različnih stopenj (od opalescence do visoke motnosti) ali kosmičev. Kontrola je dno cevi, ki ni izpostavljena toploti. Ta vzorec zazna količino beljakovin, začenši z 0,015% (% o - promille).

2. Reakcija z 20% raztopino sulfosalicilne kisline. 20% raztopino sulfosalicilne kisline pripravimo takole: 20 g sulfosalicilne kisline raztopimo v 70-80 ml destilirane vode, prenesemo v 100-ml valj in dopolnimo z destilirano vodo do oznake. Pripravljeni reagent se shrani v posodo iz temnega stekla.

Tehnika določanja beljakovin. V dve epruveti z enakim premerom postavimo 2-3 ml filtriranega urina šibko kisle reakcije, v eno epruveto dodamo 3-4 kapljice 20% raztopine sulfosalicilne kisline, druga cev služi za kontrolo. V prisotnosti beljakovin v epruveti z reagentom se pojavijo motnost ali kosmiči koaguliranih beljakovin. V kontrolni cevi tekočina ostaja bistra. Poleg beljakovin iz sirotke se sulfosalicilna kislina obnavlja v albumih (peptidih), ki so produkt razgradnje beljakovin. Da bi pojasnili vzroke motnosti urina, se epruveta z urinom segreje. Motnost, katere vzrok nastanka so bili proteini sirotke, se povečuje, motnost zaradi prisotnosti albumoze pa izgine. Ta test ima enako občutljivost kot prejšnji.

3. Reakcija z 50% raztopino dušikove kisline (Hellerjev vzorec). 50% raztopino dušikove kisline pripravimo na naslednji način: 50 ml destilirane vode (razredčitev 1: 1) se vlije v 50 ml dušikove kisline s specifično težo 1,2-1,4.

Tehnika določanja beljakovin. V ozko majhno epruveto (aglutinacija Tina) nalijemo 1 ml 50% dušikove kisline. V pipeto z ozkim, povlečenim koncem se zlije 1 ml filtriranega testnega urina, nanese na reagent in cev se prenese v navpični položaj. V prisotnosti beljakovine se na meji tekočine pojavi bel obroč. Čas nastanka obroča, njegove lastnosti so odvisne od količine beljakovin: če je beljakovina majhna, se obroč ne pojavi takoj, zato se njegov videz spremlja 2,5-3 minute. Najmanjša količina beljakovin, določena s to metodo, je 0,033 ° / oo. Z manjšo vsebnostjo beljakovin v urinskem obroču ne nastane. Zapisi o rezultatih reakcije, proizvedeni na črnem ozadju v oddani svetlobi.

4. Reakcija z 1% raztopino dušikove kisline v nasičeni raztopini natrijevega klorida - spremenjen Gellerjev test (v skladu z Larionic). Za izvajanje testov uporabite 1% raztopino dušikove kisline, pripravljene na nasičeni raztopini kuhinjske soli (Larionic agent). 35 g natrijevega klorida raztopimo v 100 ml destiliranega ogljikovega dioksida, raztopino filtriramo in 99 ml pripravljene nasičene raztopine natrijevega klorida zlijemo v 1 ml koncentrirane dušikove kisline s specifično težo 1,2-1,4.

Tehnika določanja beljakovin je enaka kot pri reakciji s 50% raztopino dušikove kisline (Gellerjev test), vendar se namesto 1 ml 50% raztopine dušikove kisline v epruveto vlije 1 ml Larionic Reagenta in nanese 1 ml urina. Pojav belega obroča na vmesniku tekočine kaže na prisotnost beljakovin v urinu, ki se preučuje. Larionov test je tako občutljiv kot Gellerjev test.

5. Kolorimetrični (suhi) vzorec za kvalitativno določanje beljakovin. Kolorimetrični (suhi) vzorec za kvalitativno določanje beljakovin v urinu temelji na učinku, ki ga ima beljakovina na barvo indikatorja v puferski raztopini.

Tehnika določanja beljakovin. Del indikatorskega papirja, ki je namenjen določanju beljakovin, se za kratek čas potopi v urin. Vzorec velja za pozitivnega, če je papir pobarvan v modro-zeleni barvi.

Kvantitativna določitev beljakovin v urinu

Kvantitativna določitev beljakovin v urinu temelji na dejstvu, da ko je beljakovina, ki vsebuje urin, večplastna, 50% raztopina dušikove kisline ali reagenta za lionsko kislino tvori bel obroč na meji dveh tekočin, in če se po 3 minutah pojavi bel bel obroč, je vsebnost proteinov 0,033% približno 33 mg v 1000 ml urina. Videz obroča pred 3 minutami kaže na večjo vsebnost beljakovin v urinu.
Pri določanju količine beljakovin v urinu sledijo naslednja pravila:

1. Kvantitativna določitev beljakovin, proizvedenih le v tistih delih urina, kjer je bila kakovostno ugotovljena.
2. Določanje poteka s skrbno filtriranim urinom.
3. Natančno sledite metodi razslojevanja preučevanega urina s 50% raztopino dušikove kisline ali lionske kisline v razmerju urinskega reagenta (1: 1).
4. Čas pojavljanja obroča je določen s štoparico: končni izračun količine beljakovin upošteva čas nanosa urina na dušikovo kislino, ki je 15 sekund.
5. Razredčevanje urina na osnovi lastnosti obroča. Poleg tega se pripravi vsako nadaljnje redčenje urina iz prejšnjega.
6. Opredelitev obročev, izdelanih na črnem ozadju.

Najpogostejša sta metoda kvantitativnega določanja beljakovin v urinu: metoda Roberts-Stolnikov-Brandberg in metoda S. L. Ehrlicha in A. Ya. Altgauzena.

1. Metoda Roberts-Stolnikov-Brandberg. V skladu s to metodo se količina beljakovin v urinu določi z redčenjem, dokler se naslednjič ne uporabi urin na 50% raztopino dušikove kisline ali reagent Larion Ring natančno 3 minute. Izračun količine beljakovin, ki se proizvede z množenjem 0,033% na stopnjo razredčitve urina. Dobljeni rezultat izraža količino beljakovin v miligramih na 1000 ml urina, to je v promilu (% o).
2. Metoda S. L. Ehrlich in A. Ya. Altgauzena. Serijo epruvet za aglutinacijo postavimo v stojalo, v katerega se vlije 1 ml 50% raztopine dušikove kisline ali reagenta za lionsko kislino. Preiskovani urin se vzame s posebno, čisto, suho pipeto z ozkim koncem, ki je potegnjen in nanešen na reagent, po katerem se začne štoparica. Čas nastanka obroča se spremlja tako, da se cev postavi na črno ozadje. Ko se prikaže zvonjenje, se štoparica izklopi.

Ko se laminacija urina, odvisno od količine beljakovin, pojavi kompaktni, široki ali nitasti obroč. Takoj po nanosu urina na reagent se pojavi kompakten širok obroč. Navojni obroč se lahko pojavi takoj, pred iztekom ene minute, ali v intervalu od ene do štirih minut.

Z pojavom navojnega obroča v razponu od ene do štirih minut ni potrebno redčiti urina!
Za izračun količine beljakovin v tem primeru zadostuje uporaba tabelaričnega načrta, ki so ga predlagali avtorji (tabela 1).

Primer 1. Pri nanosu urina na reagent se po 2 minutah tvori nitasti obroč. Če bi se obroč tvoril 3 minute, bi bila količina beljakovin 0,033% o.

V tem primeru je bil obroč nastal prej. Ustrezna sprememba po tabelaričnem načrtu za čas 2 minuti je 1 + 1/8. To pomeni, da bo beljakovina v danem deležu urina 1 + 1/8-krat več kot 0,033 ° / oo, tj. 0,033% o X (1 + 1/8) = 0,037 ° / oo.

Ko se pojavi navojni obroč, do 1 minute, tj. Po 40-60 sekundah, se en urin razredči 1,5-krat (2 dela urina + 1 del vode) in nato ponovno razredči urin nad reagentom in zabeleži videz obroča. Pri izračunu rezultatov upoštevajte, da je bil urin razredčen 1,5-krat.

Primer 2. Po nanosu 1,5-kratnega razredčenega urina se je za 2 minuti pojavil navojni obroč. Če bi se obroč pojavil za 3 minute, bi bila beljakovina 0,033%. Ustrezna sprememba v skladu z načrtom tabele za čas 2 minuti je enaka 1 + 1/8. Protein v urinu vsebuje 0,033% OX1,5X (1 + 1/8) = 0,056% o.

Če se takoj pojavi navojni obroč, se urin dvakrat razredči (1 del urina + 1 del vode). Razredčeni urin se ponovno nanese na reagent in po 1 minuti opazimo videz obroča.

Primer 3. Pri nanosu razredčenega 2-kratnega urina na reagent se je po 1 minuti in 15 sekundah pojavil navojni obroč. Potem bo količina beljakovin v preučevanem urinu po analogiji s prejšnjimi izračuni enaka
0,033% oX2X (1 + 3/8) = 0,091%.
V primeru širokega obroča se urin 4-krat razredči (1 del urina + 3 dele vode).
Med nadaljnjim nanosom razredčenega urina lahko tvorimo filamentni obroč pred in po eni minuti. V takih primerih izračun količine beljakovine, proizvedene po analogiji s prejšnjimi primeri, t.j. 0,033% o, pomnožimo s stopnjo redčenja in ustrezno korekcijo.

Primer 1. Obroček po redčenju urina 4-krat se je pojavil takoj. Urin razredčen 2-krat. Po nanosu urina razredčite 8-krat (4X2), po 1,5 minutah pa se oblikuje navojni obroč. V tem primeru je količina beljakovin 0,033% oX8X1,25 = 0,33% o, itd.
Ko se pojavi kompaktni prstan, se urin 8-krat razredči (1 del urina + 7 delov vode). Med nadaljnjim nanosom razredčenega urina na reagent se lahko tvori kompaktni ali širok ali nitasti obroč.

Primer 2. Pri nanosu urina na dušikovo kislino je nastal kompaktni obroč. Urin se razredči 8-krat (1 del urina + 7 delov vode) in ponovno nastane plastenje. Hkrati spet izkazalo, kompaktni prstan. Nato urin razredčimo še 8-krat (pri tem se v valj vstavi 1 del razredčenega urina ali v epruveto in dodamo 7 delov vode). Po naslednjem nanosu razredčenega urina se takoj tvori nitasti obroč. Urin se razredči 2-krat (1 del urina + 1 del vode). Po naslednjem nanosu razredčenega urina smo oblikovali 2-minutni navojni obroč. Izračun količine beljakovin v določenem deležu urina se pripravi na naslednji način: 0,033% X8X8X2X (1 + 1/8) = 4,8% o.

Poleg planske tabele je tabela z izračunanimi številkami beljakovin (tabela 2). Če se urin ne razredči, se količina beljakovin poišče v stolpcu »Celotni nerazredčeni urin«. Pri vzreji urina uporabite celo število (8,4,2) tabele. 1. Pri redčenju urina 1,5-krat se uporabi tabela. 2

Tehnika z uporabo tabele za določanje beljakovin v urinu

V ustreznih stolpcih tabele predlagamo čas videza obroča in stopnjo razredčitve urina.
Podatki, ki se nahajajo na presečišču vodoravne in navpične črte, ki izhajajo iz teh dveh kazalnikov, kažejo količino beljakovin v preučevanem urinu (% o).

Možno je, da ob pozitivnem testu kakovosti za beljakovine obroč ne tvori raztopine za plastenje z 50% dušikovo kislino. To pomeni, da je v beljakovini urina manj kot 0,033% o. V takih primerih je količina beljakovin v obliki analize označena z izrazom "sledi".

Če je beljakovina kvantificirana, je vsebnost beljakovin promila zabeležena na urinski analizi, npr. "Beljakovina - 0,66% o".

Poleg kvantitativnega določanja beljakovin v ločenem urinu se izračuna njegova dnevna količina v gramih. V ta namen zberemo dnevni urin, izmerimo njegovo količino in določimo vsebnost beljakovin v promilu. Nato opravite izračun. Na primer, dnevna količina urina je 1800 ml, beljakovine - 7 ° / oo. To pomeni, da beljakovine vsebujejo dnevno količino urina: 1,8X7 = 12,6 g.

Nasvet 1: Kako določiti beljakovine v urinu

• določanje beljakovin v urinu

Urin je kompleksna raztopina, ki vsebuje več kot 150 spojin. Nekatere specifične snovi, na primer aceton, žolčne kisline, beljakovine, glukoza so lahko prisotne v urinu le pri nekaterih boleznih.

Za nadzor zdravja ljudi je treba najprej določiti količino urina. Normalno je nastajanje 1-1,8 litra urina na dan. Če se izloči več kot 2 litra urina, je to znak morebitne motnje v delovanju ledvic, diabetesa mellitusa in številnih drugih bolezni. Če se na dan proizvede manj kot 0,5 litra urina, pride do blokade sečevoda ali mehurja.

Barva urina

Barva izločenega urina je odvisna od številnih dejavnikov in je zato lahko od svetlo rumene do oranžne. Na prisotnost določenih odtenkov lahko vplivajo nekatera živila, pa tudi zdravila, ki jih naredi človek.

Po zaužitju zdravil lahko urin obarva in postane rdeč. Če se oseba aktivno giblje, z veliko količino znoja, bo urin intenzivno rumene barve, kot pri jemanju sredstev, kot so "Nitroxoline" ali "Biomitsin".

Če oseba ni vzela barvil živil in zdravil, vendar je barva njegovega urina drugačna od običajne, lahko sumimo na prisotnost katerekoli bolezni v telesu. Na primer, pri boleznih jeter bo urin temno rumene ali zelenkaste barve.

Prisotnost krvi v izločenem urinu jasno kaže na prisotnost kamna v sečevodu ali ledvični krvavitvi, če obstaja bolečinski sindrom.

Če je uriniranje oteženo - to lahko kaže na vnetni proces, ki ga povzroča katera koli okužba v mehurju. Toda umazani in blatni urin kaže na hudo ledvično bolezen.

Beljakovine v urinu

V krvi osebe ni beljakovin ali je njihova količina tako majhna, da ni določena z laboratorijskimi testi. V primeru odkrivanja beljakovin v urinu je potrebno opraviti ponavljajoče se teste, saj je lahko prisoten med jutranjim prebujanjem osebe, pa tudi po težkem fizičnem delu ali vadbi pri športnikih.

Vizualno ugotoviti, ali je v urinu prisotna beljakovina, je 100% nemogoče. Lahko se samo ugani, kdaj je v urinu velika količina belkasto obarvanih kosmičev.

Če se beljakovine v urinu ponovno odkrijejo, to kaže na prisotnost katere koli bolezni ledvic. Vnetni procesi, ki se pojavljajo v njih, povzročajo majhno povečanje količine beljakovin. Če se v urinu izloči več kot 2 grama, je to alarmni signal.

Beljakovine v urinu, laboratorijski testi

Metode za določanje beljakovin v urinu

Za kliniko je pomembna kvalitativna in kvantitativna določitev beljakovin v urinu.

Kvalitativni testi za določanje beljakovin v urinu
Predlagali več kot 100 reakcij za kvalitativno določitev beljakovin v urinu. Večina jih temelji na beljakovinskih padavinah s fizikalnimi (ogrevalnimi) ali kemičnimi sredstvi. Prisotnost beljakovin dokazuje pojav motnosti.

Zanimivi so tudi kolorimetrični suhi vzorci.

Spodaj bo opisan samo najpomembnejši za prakso vzorca.

Analiza sulfosalicilne kisline. V nekaj mililitrov urina dodajte 2-4 kapljice 20% raztopine sulfosalicilne kisline. Ko se pojavi pozitivna reakcija, je motnost. Rezultat je označen z izrazi: opalescenca, šibko pozitivna, pozitivna ali močno pozitivna reakcija. Test za sulfosalicilno kislino je eden izmed najbolj občutljivih vzorcev za vzpostavitev beljakovin v urinu. Najde celo najmanjše nenormalno povečanje količine beljakovin v urinu. Zahvaljujoč preprosti tehniki je ta test našel široko uporabo.

Test z aseptolom. Aseptol je nadomestek za sulfosalicilno kislino. Lahko se pripravi iz materialov, ki so na voljo v vsakem laboratoriju (fenol in žveplova kislina). Kot reagent uporabimo 20% raztopino aseptola. Test se izvaja na naslednji način: v epruveto, ki vsebuje 2-3 ml urina, dodamo 0,5-1-1 ml raztopine aseptola na dno. Če se na meji med dvema tekočinama izkaže beli obroč koaguliranega proteina, je vzorec pozitiven.

Gellerjev test. Pod nekaj mililitri urina se nasoli 1-2 ml 30% dušikove kisline (teža specifične teže 1,20). Če se na vmesniku obeh tekočin proizvaja bel obroč, je vzorec pozitiven. Reakcija postane pozitivna, če je beljakovina večja od 3,3 mg%. Včasih dobimo bel obroč, ko so prisotne velike količine uratov. V nasprotju z beljakovinskim obročem se uratni obroč ne pojavi na meji med obema tekočinama, ampak nekoliko višji. Larionova predlaga, da se namesto 30% dušikove kisline uporabi kot reagent 1% raztopina dušikove kisline v nasičeni raztopini natrijevega klorida; To zagotavlja velike prihranke dušikove kisline.

Vzorec z zlezystosinerodisty kalija in ocetne kisline. Ta reakcija omogoča izolacijo serumskih proteinov iz nukleoalbumina.

Enake količine urina se vlijejo v dve cevi. V eno od njih dodamo nekaj kapljic 30% raztopine ocetne kisline. Če v primerjavi s kontrolno epruveto dobimo motnost, vsebuje urin nukleoalbumin. Če se ne pojavi motnost, se vsebina obeh epruvet zmeša in ponovno razdeli na dva dela. V eno od dveh epruvet se doda nekaj kapljic (presežek lahko spremeni pozitivni vzorec v negativni) 10% raztopine rumene soli (kalijev ferocianidni sirup). V prisotnosti sirotkinih beljakovin dobimo motnost.

S koncentriranim urinom, ki vsebuje velike količine sečne kisline in urata, je treba po predhodnem razredčenju (2 - 3 krat) urina z vodo opraviti vzorec s kalijem in sirupom železa in sirupa. V nasprotnem primeru lahko pride do motnosti, ki jo povzroča oborjena sečna kislina.

To je še posebej pomembno pri preučevanju urina pri dojenčkih, ki vsebuje veliko sečne kisline in urata.

Od preostalih kvalitativnih vzorcev beljakovin v urinu, ki temeljijo na padavinah beljakovin, so našli uporabo: test vrenja, Esbach, Perdi, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann-Suzanne, Jolla, Exton, Kamlet, Kobuladze, Liliendal-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushia, itd.

Pri izdelavi visokokakovostnih vzorcev beljakovin v urinu, ki temeljijo na odlaganju beljakovin, je treba upoštevati naslednja splošna pravila, katerih kršitev vodi do pomembnih napak v študiji.

1. Preskušani urin mora biti kisel. Z alkalno reakcijo se urin rahlo nakisa z ocetno kislino. Priprava vzorca z alkalnim urinom v primerih, ko se kot reagent uporablja kislina, lahko vodi do nevtralizacije kisline in do negativnega rezultata s pozitivno reakcijo. To še posebej velja za preskus s sulfosalicilno kislino, saj se kislina dodaja v zelo majhnih količinah in se lahko zlahka nevtralizira.

2. Preiskovani urin mora biti pregleden.

3. Vzorce za določanje beljakovin v urinu je treba vedno opraviti v dveh epruvetah, od katerih ena služi kot kontrola. Brez kontrolne cevi med reakcijami ni opaziti svetlobe.

4. Količina dodane kisline v vzorcih ne sme biti prevelika. Velika količina kisline lahko privede do tvorbe topnega kislinskega albumina in do transformacije pozitivnega vzorca v negativno.

Kolorimetrični suhi vzorci si zaradi svoje enostavne tehnike zaslužijo veliko pozornosti. Pri uporabi teh vzorcev je učinek, ki ga ima beljakovina na barvo indikatorja v puferski raztopini (ti indikatorji napak beljakovin). V kratkem času se v urin absorbira filtrirni papir, napolnjen s pufrom citronske kisline in bromofenol modro. Vzorec je pozitiven, če postane modro-zelena. Če primerjamo intenzivnost obarvanja s standardi barvnega papirja, je mogoče izpeljati približno in kvantitativne zaključke. Indikatorski papir se prodaja v pakiranjih z ustreznimi barvnimi standardi, kot je univerzalni indikatorski papir.

Metode za kvantitativno določanje beljakovin v urinu
Predložene so bile številne metode za kvantitativno določanje beljakovin v urinu. Natančne kvantitativne metode za določanje beljakovin v biološkem materialu se zaradi kompleksnih in dolgotrajnih tehnik ne uporabljajo široko pri določanju beljakovin v urinu. Volumetrične metode so zelo razširjene, zlasti metoda Esbach. So zelo preproste, vendar žal niso zelo natančne. Metode skupine Brandberg-Stolnikov, ki dajejo natančnejše rezultate kot volumetrične metode, s sorazmerno preprosto tehniko, so primerne tudi za kliniko. V prisotnosti fotometra ali nefelometra so primerne tudi nefelometrične metode.

Esbachova metoda. Predlagal ga je pariški zdravnik Esbach leta 1874. Posebno cevko (Esbachov albuminometer) nalijemo z urinom in reagentom. Cev je zatesnjena z gumijastim zamaškom, temeljito premešana (brez mešanja!) In ostala v pokončnem položaju do naslednjega dne. Sporočite delitev, ki doseže kolono beljakovinske oborine. Najdeno število kaže vsebnost beljakovin. Z Esbachovo metodo je zelo pomembno, da je urin kisel. Alkalni urin lahko nevtralizira kisle sestavine reagenta in prepreči obarjanje beljakovin.

Prednosti metode: v praksi je preprosta in priročna.

Slabosti: metoda je netočna, rezultat se doseže po 24 - 48 urah.

Brandberg-Stolnikovova metoda. Temelji na Gellerjevem testu kakovosti. Gellerjev vzorec se lahko uporabi za kvantitativno določanje, ker daje pozitivni rezultat z vsebnostjo beljakovin nad 3,3 mg%. To je končna koncentracija beljakovin, pod katero vzorec postane negativen.

Sprememba Ehrlicha in Althausena. Sovjetski znanstveniki S. L. Ehrlich in A. Ya. Altgauzen sta spremenila Brandberg-Stolnikovovo metodo, kar kaže na možnosti poenostavitve raziskav in prihranka časa pri njegovi proizvodnji.

Prva poenostavitev je povezana s časom nastanka obroča. Natančno je določen čas njegovega nastopa, ne da bi se nujno držali 2. in 3. minute.

Druga poenostavitev omogoča določitev vrste vzreje. Avtorji so dokazali, da lahko zahtevano razredčitev približno določimo z vrsto dobljenega obroča. Razlikujejo nitaste, široke
in kompaktni prstan.

Od nefelometričnih metod je treba omeniti metodo Kingsberry in Clark. 2,5 ml filtriranega urina se vlije v majhen merilni valj, dopolni s 3% vodno raztopino sulfosalicilne kisline na 10 ml. Dobro premešamo in po 5 minutah fotometriramo v kiveti velikosti 1 cm, z rumenim filtrom in uporabimo vodo kot kompenzacijsko tekočino. S fotometrom Pulfrich ugotovljeno izumrtje, pomnoženo z 2,5, daje količino beljakovin v% o. V primeru, da je indeks ekstinkcije višji od 1,0, se urin predhodno razredči 2-krat, 4-krat ali celo več.

Da bi dobili jasno predstavo o količini beljakovin, ki se izločajo v urinu, je treba določiti ne le njihovo koncentracijo v ločenem delu urina, temveč tudi njihovo skupno dnevno količino. V ta namen zberemo 24 urni urin, izmerimo njegovo prostornino v mililitrih in določimo koncentracijo beljakovin v dnevnem urinu v g%. Količina beljakovin, ki se izločijo v urinu v 24 urah, se določi glede na dnevno količino urina v gramih.

Klinični pomen beljakovin v urinu

Humani urin običajno vsebuje minimalne količine beljakovin, ki jih ni mogoče ugotoviti z običajnimi kvalitativnimi vzorci za testiranje beljakovin v urinu. Izločanje velikih količin beljakovin, pri katerih navadni visokokakovostni vzorci za beljakovine v urinu postanejo pozitivni - nenormalni pojav, imenovan proteinurija. Proteinurija je fiziološka le pri novorojenčku, v prvih 4-10 dneh po rojstvu. Ime albuminurija, ki se običajno uporablja, je napačno, saj se ne le albumin, ampak tudi druge vrste beljakovin (globulini, itd.) Izločajo z urinom.

Proteinurijo, kot diagnostični simptom, je leta 1770 odkril Cotuno.

Najpomembnejša funkcionalna ledvična proteinurija pri otrocih je naslednja:

1. Fiziološka proteinurija novorojenčka. Pojavlja se pri večini novorojenčkov in nima nobenega škodljivega pomena. Razlaga je nezreli renalni filter, poškodba pri rojstvu ali izguba tekočine v prvih dneh življenja. Fiziološka proteinurija izgine na 4-10. Dan po rojstvu (kasneje pri nedonošenčkih). Količina beljakovin je majhna. Je nukleoalbumin.

Neonatalna albuminurija, ki traja dolgo časa, je lahko simptom kongenitalne lues.

2. Albuminurija možganske kapi. Povzročajo jih prekoračitev praga normalne razdražljivosti ledvičnega filtra zaradi pomembnih mehanskih, toplotnih, kemičnih, duševnih in drugih draženja - izguba tekočine pri dojenčkih (dehidracijska proteinurija), hladno kopanje, bogata hrana, bogata z beljakovinami (prebavna proteinurija), palpacija ledvic (palpatorna albuminurija), palpacija ledvic (palpatorna albuminurija), fizično preobremenjen, strah itd.

Albuminurija možganske kapi se lažje pojavi pri otrocih v zgodnjem otroštvu kot pri otrocih starejše starosti in pri odraslih, saj so ledvice dojenčka in majhnega otroka lažje razdražene. Dehidracija albuminurije (motnje hranjenja, hidrolabilnost, toksikoza, driska, bruhanje) je še posebej pogosta pri dojenčkih.

Albuminurija možganske kapi je benigna. Izginjajo takoj po odpravi vzrokov. Občasno se v usedlini pojavijo občasni levkociti, valji in rdeče krvne celice. Protein je najpogosteje nukleoalbumin.

3. Ortostatska proteinurija. Ta pogoj je značilen za otroke predšolske in šolske starosti. Pojavi se na podlagi vazomotornih motenj v prekrvavitvi ledvic. Za ortostatsko albuminurijo (od tod tudi njeno ime) je značilno, da se pojavi le, ko otrok stoji, ko je hrbtenica v lordotičnem položaju. V ležečem položaju izgine. Sproži se nukleoalbumin. V dvomljivih primerih lahko uporabite ortostatsko izkušnjo, ki je sestavljena iz naslednjega: zvečer, eno uro pred ležanjem, otrok izprazni mehur; zjutraj, ko vstaneš iz postelje, spet sprošča urin. Ta urin ne vsebuje beljakovin. Nato otroka na kolena položimo za 15-30 minut s palico za hrbtom, med komolci obeh ukrivljenih rok. Ustvari položaj lordoze, ki vodi do sproščanja beljakovin, brez sprememb v sedimentu.

Z ortostatsko albuminurijo se lahko sprosti 8–10 g beljakovin na dan.

Organska ledvična proteinurija je med vsemi proteinurijami pomembnega kliničnega pomena. Povzročajo jih organske ledvične bolezni (nefritis, nefroza, nefroskleroza). Proteinurija je eden najpomembnejših in najbolj znanih simptomov organske ledvične bolezni.

1. Pri akutnih in kroničnih glomerulonefritih se redno pojavlja proteinurija. Količina beljakovin je zmerna in ne obstaja vzporednica med stopnjo proteinurije in resnostjo bolezni. V nasprotju s tem pa se kronična in hujša žad pogosto pojavlja pri manjših količinah beljakovin kot akutna. Po akutnem nefritisu, včasih za daljši čas (leta), so ugotovljene majhne količine beljakovin v urinu, ki nimajo patološkega pomena ("ostanek albuminurije"). Ne smemo pozabiti, da se lahko pojavi tudi »nefritis brez proteinurije«. Včasih se beljakovine nahajajo v enem delu urina, v drugem pa ne. Razmerje med albuminom in globulini pri akutnem nefritisu je majhno, pri kroničnem nefritisu pa višje.

2. V primeru nefroskleroze je količina beljakovin v urinu neznatna, pogosto se pojavijo oblike bolezni brez beljakovin v urinu.

3. Od vseh ledvičnih bolezni se nefroza pojavlja z najbolj izrazito proteinurijo.

4. V primeru infekcijskih in toksičnih razmer najdemo tako imenovano febrilno in toksično proteinurijo. To so akutna nefroza, pri kateri je količina beljakovin majhna. V to skupino spadajo tudi proteinurija v konvulzivnih stanjih (konvulzije), hipertiroidizem, zlatenica, invaginacije, enterokolitis, opekline, huda anemija itd. Ti albuminuriji so benigni in hitro minejo (prehodna albuminurija).

5. Ko se kri v ledvicah stagnira, se pojavi tako imenovana kongestivna albuminurija, ki je značilna za kardiovaskularne bolnike v fazi dekompenzacije. Najdemo ga tudi v ascitesu in tumorjih trebuha.

Pri febrilni, toksični in kongestivni albuminuriji je povečana prepustnost ledvičnega filtra še posebej izrazita. Po mnenju nekaterih avtorjev se mnogi na teh proteinurijih pojavljajo brez organskih poškodb ledvičnega parenhima.

Extrarenalni albuminurijo običajno povzročajo beljakovinske nečistoče (izločki, razgrajene celice), ki jih izločajo oboleli urinarni trakt in spolni organi. Pogosto so ugotovili, da je albuminrija zaradi cistopielitisa (pyuria), redkeje zaradi vulvovaginitisa, kamenca in tumorjev sečil.

Ko extrarenal albuminurija v sedimentu našli veliko število levkocitov in bakterij. Ledvični elementi se skoraj nikoli ne pojavijo. Količina beljakovin je majhna. Filtriran ali centrifugiran urin ponavadi ne daje pozitivnega vzorca beljakovin.

Pri ljudeh, ki se opomorejo od pielitisa, albuminurija izgine po bakteriuriji in puriji.

Kot značilni pojav je treba poudariti, da so organske ledvične bolezni v zgodnjem otroštvu izjemno redke, zato je tudi redka organska proteinurija. Od njih najdemo predvsem febrilno in strupeno. Za razliko od organske proteinurije je albuminurija kapi zelo pogosta pri majhnih otrocih.

Pri starejših otrocih je organska proteinurija pogosteje funkcionalna. Na splošno je s starostjo funkcionalna proteinurija manj pogosta in bolj organska.

Elektroforetske študije beljakovin v urinu

Številni avtorji uporabljajo elektroforetsko metodo za preučevanje beljakovin v urinu (uroproteini). Iz dobljenega elektroforegrama je jasno, da imajo enako kvalitativno sestavo kot plazemski proteini. To kaže, da beljakovine v urinu izvirajo iz beljakovin v plazmi.